改造後的反轉錄酶能轉錄出更大比例的模板分子

逆轉錄酶和反轉錄酶是一樣的嗎

缺失RNase H活性的Mo-MLV反轉錄酶突變體也有商業化銷售（如Life Technologies 公司和Invitrogen 公司的SuperScript 酶，以及Agilent 公司的StrataSript酶）。與野生型酶相比，改造後的反轉錄酶能轉錄出更大比例的模板分子，而且可合成較長的cDNA分子。

此外，還能在更高的溫度下合成cDNA，這對於易摺疊成二級結構的RNA模板更為有利。耐高溫（60“C ）的反轉錄酶改構體也可在Life Technologies公司（ SuperScript II，ThermoScript）和Agilent公司（AffinityScript） 購買。

這些酶較中溫反轉錄酶能夠產生更長的cDNA，現在已廣泛用於-步法和兩步法RT-PCR。

●嗜熱Tth DNA聚合酶，是一種由嗜熱真細菌（棲熱菌屬）來源的、在Mn2*條件下顯示反轉錄酶活性的高溫酶（MyersandGelfand1991）。這種酶用在RT-PCR中的主要優點在於，它能在反轉錄與擴增兩個階段均起作用，實驗可在同一支反應管內進行（Myers et al。1994）。

但是，Tth DNA聚合酶不能應用於以Oligo （dT）或隨機六寡核苷酸作為引物的反應，因為在嗜熱DNA聚合酶催化反應的最適溫度（60~70‘C ）下，這兩種引物不能與RNA模板形成穩定的雜合體。

有幾家公司銷售該酶的增強體，它能有效地將RNA複製成cDNA。這些酶主要用於一步法RT-PCR （詳見本方案結尾處資訊欄“mRNA反轉錄產物cDNA的擴增： 一步法RT-PCR”）關於RT-PCR不同反轉錄酶效能的更多資訊，參見Stahlberg等（2004b）。