土壤基因組DNA提取試劑盒

土壤基因組DNA提取試劑盒

產品貨號：

26241

產品規格：

50T/100T

產品

簡介

：

本試劑盒適合於從褐土、淤泥、火山灰等各種極端土壤環境中提取微生物

DNA

。對土壤中各種細菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物

DNA

的多型性

。

本試劑盒採用我公司特有的腐殖質吸附材料，可高效專一的去除各種腐殖質成分而絲毫不會影響

DNA

的產率，純度較酚、氯仿抽提法提高數倍

。

使用本試劑盒提取的

DNA

產量大、完整性好，可直接用於各種常規操作，包括酶切、

PCR

、

文庫構建

、

Southern

雜交等實驗。

產品組成：

注：試劑盒開封后溶液A、B、C、D需在2-8℃儲存。PCR增強劑-20℃儲存。

操作步驟

：

使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標籤。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1。

稱取土壤樣本

0。1-0。5g

，在液氮中充分研磨成細粉末，加入

450ul

溶液

A

震盪混勻。

*

也可直接稱取樣本

0。1-0。5g

於離心管

（

建議使用

2ml

圓底管

）

，加入

450ul

溶液

A

劇烈震盪混勻

1-2min

至沒有固體塊

。

使用液氮研磨效果最佳。

2。

加入

50ul

溶液

B

充分顛倒混勻

（

不要劇烈震盪

）

，

65℃

水浴

6min

，每

2min

充分顛倒混勻一次。

3。

加入

100ul

溶液

C

充分顛倒混勻

（

不要劇烈震盪

）

，

12000rpm

離心

10min

。

4。

將上清轉移到新的離心管，

12000rpm

離心

2min

。

5。

在吸附柱中加入

200ul

溶液

D

，將離心後的上清加入到帶有溶液

D

的吸附柱中，用移液器吹吸幾次混勻，

12000rpm

離心

1min

。

6。

將收集管中的濾出液混勻後重新吸入吸附柱

（

必須

）

，

12000rpm

離心

1min

。

7。

倒掉收集管中的廢液，在吸附柱中加入漂洗液

500ul

，

12000rpm

離心

1min

。

8。

倒掉收集管中的廢液，重複步驟

7

兩次

（

共漂洗三次

）

。

9。

倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管，

12000rpm

離心

2min

。

10。

拿出吸附柱在室溫乾燥數分鐘

（

因季節及氣候等因素不等

）

，或

50℃

乾燥

1min

。

11。

將吸附柱放入一個新的離心管中，加入

50-100ul

洗脫液

（65℃

預熱

）

，

12000rpm

離心

1min

。

12。

將離心管中的液體重新加入到吸附柱中，

12000rpm

離心

1min

。離心管中即為土壤微生物

DNA

溶液。

13。

若產物

PCR

效果差，可以適當稀釋

DNA

產物，或新增

1/10

體積的

PCR

增強劑。

注意事項：

1。

新鮮的土壤樣本會得到更高的產率，不同樣本在取樣前應先查閱相應的最佳儲存條件。

2。

若溶液中出現渾濁可在

37

℃水浴中溶解片刻至清澈，不會影響結果。

3。

在需要吸取上清液的步驟中應避免吸到沉澱，否則會堵塞吸附柱，並影響產物純度。

4。

洗脫緩衝液的體積最好不少於

50ul

，體積過小會影響回收效率；建議使用試劑盒附帶的洗脫緩衝液，用水洗脫也會損失部分產物；

DNA

應儲存在

-20

℃避免反覆凍融，以防降解。

5。

若產物含有腐殖質殘餘則會嚴重影響

DNA

的光吸收值，應採取電泳檢測和分光光度計檢測相結合的方式鑑定。

6。

液體試劑避免接觸面板，若意外接觸應立即使用大量清水沖洗。

儲存條件：

室溫

（1

5-

25℃）

乾燥儲存，複檢期

12

個月，

2

-8℃

儲存時間更長。

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