雙孢蘑菇菌種國家標準

蘑菇菌包發黃是黴菌嗎

雙孢蘑菇菌種國家標準

1

範圍

本標準規定了雙孢蘑菇（

Agaricus bisporus

）菌種的質量要求、試驗方法、檢驗規則及標籤、標誌、包裝、貯運等。本標準適用於雙孢蘑菇（

Agaricus bisporus

）的生產、流通和使用。

2

引用標準

下列標準所包含的條文，透過在本標準中引用而構成為本標準的條文。在本標準出版時，所示版本均為有效。所有標準都會被修訂，使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。

GB191

-

1990

包裝儲運圖示標準

GB4789。28

-

1994

食品衛生微生物學檢驗 染色法、培養基和試劑

GB9687

-

1988

食品包裝用聚乙烯成型品衛生標準

GB9688

-

1988

食品包裝用聚丙烯成型品衛生標準

GB/T12728

-

1991

食用菌術語

3

定義

本標準採用下列定義。

3。1

母種

stock culture

經各種方法分離、選育或雜交得到的具有出菇能力的菌絲體純培養物及其繼代培養物。

3。2

原種

pre-culture spawn

由母種移植、擴大培養而成的菌絲體純培養物。栽培種

spawn

由原種移植、擴大培養而成的菌絲體純培養物。

3。4

拮抗現象

antagonism

具有不同遺傳基因的菌落間產生不生長區帶或形成不同形式線形邊緣的現象。

3。5

無棉塑膠蓋

plastic stop

可代替塑膠蓋，帶有某種高分子或纖維材料可滿足濾菌和透氣要求的塑膠蓋。

3。6

玻璃菌種瓶

glass spawn bottle

圓柱形，容積

750mL

，耐

126

℃高溫，無色、淡綠色或淡蘭色的透明玻璃瓶。瓶體總高

190mm

±

2mm

，瓶頸高

25mm

±

1mm

，瓶口外徑

40mm

±

1mm

，瓶體外徑

82mm

±

1mm

。

3。7

塑膠菌種瓶

polypropylene spawn bottle

圓柱形，容積

850mL

，耐

126

℃高溫，白色、半透明，衛生標準符合

GB9688

規定的塑膠瓶。瓶體總高

165mm

±

2mm

，瓶頸高

28mm

±

1mm

，瓶口外徑

63mm

±

1mm

，瓶體外徑

90mm

±

1mm

。

3。8

角變

sector

因菌絲體區域性變異或感染病毒而導致菌絲變細、生長緩慢、菌絲體表面特徵成角狀異常的現象。

3。9

高溫抑制線

high temperatured line

食用菌菌種在生長過程中受高溫的不良影響，培養物出現的圈狀發黃、發暗或菌絲變稀弱的現象。

3。10

同工酶

isoenzyme

催化相同生化反應，而結構及理化性質不同的酶分子。透過凝膠電泳使同工酶分離成遷移率不同的區帶，經生物化學染色後顯示出的同工酶譜，可對生物品種進行酶分子水平的鑑別或鑑定。

4

質量要求

4。1

母種

4。1。1

容器規格 採用

18 mmX180mm

、

20mm X200mm

的玻璃試管。

4。1。2

培養基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（

PDA

培養基），按

GB4789。28

中

4。79

規定配置。

4。1。3

感官指標 符合表

1

規定。

表

1

專案要求

棉塞或無棉塑膠蓋乾燥、潔淨、鬆緊適度，能滿足透氣和濾菌要求

培養基灌入量 為試管總體積的十分之一至五分之一

培養基斜面長度為試管總長度的二分之一至五分之一

斜面接種塊大小

3~5mmX3~5mm

培養基斜面 正面外觀

菌絲體特徵 潔白或米白、濃密、羽毛狀或葉脈狀

菌絲體表面 均勻、平整、無角變

菌絲分泌物 無

菌落邊緣整齊，無膏狀、蠟狀細菌或酵母菌菌落及黴菌菌落

培養基斜面背面外觀 培養基不幹縮，顏色均勻、無暗斑、無色素

培養物氣味有雙孢蘑菇菌種特有的香味，無酸、臭、黴等異味

培養物鏡檢 菌絲粗壯，無雜菌菌絲及孢子，無蟲及蟲卵。

4。1。4

菌絲生長速度 在適溫（

24

℃±

1

℃）下，

15

-

20

天長滿試管。

4。1。5

母種遺傳和栽培性狀 供種單位，母種需經酯酶

（Est）

同工酶型別鑑定，確認其遺傳型別與對照相同後，需再經出菇試驗確定產量及品質等栽培農藝性狀合格後，方可用於擴大繁殖或出售。

4。1。5

。1

菌絲體

Est

同工酶的聚丙烯醯胺凝膠電泳型別 包括

G

型

（

呈現

e1，e3

特徵帶

）

、

H

型

（

呈現

e2，e4

和

e30-33

特徵帶

）

、

HG1~HG2

型

（

呈現

e1，e3，e30-33

特徵帶

）

和

HG4

型

（

呈現

e1，2，3，4

和

e30-33

特徵帶

）

等。以

Est

區帶向正極泳動距離與溴酚藍指示劑向正極泳動距離的比值作為電泳相對遷移率

（Rm）

。

e1，e2，e3，e4，e30，e31，e32

和

e33

的

Rm

值分別為

0。820，0。810，0。760，0。750，0。128，0。100，0。070

和

0。010

。

4。1。5

。2

菌絲萌發、定植能力接種到適合的培養基後，在正常條件下

24

小時內萌發恢復，定植迅速、菌絲健壯，

20

天以內長滿培養基。

4。1。5

。3

結菇轉潮能力 覆土後

12

~

16

天結菇，分佈均勻；

18

~

22

天採菇，每潮菇間隔

7

~

10

天。

4。1。5

。4

抗逆性 對溫度、溼度、酸鹼度等生長條件變化耐受能力較強；對主要病蟲害的抵抗能力較強。

4。1。5

。5

生物學效率 在正常條件下生物學效率不低於

30%

。

4。2

原種

4。2。1

容器規格 玻璃菌種瓶或塑膠菌種瓶，分別符合

3。6

和

3。7

規定。

4。2。2

培養基

4。2。2

。1

腐熟麥杆或稻杆

（

幹

）77%

，腐熟牛糞粉

（

幹

）20%，

石膏粉

1%，

碳酸鈣

2%，

含水量

62%

±

1%，pH7。5

。

4。2。2

。2

腐熟棉籽殼（幹）

97%

，石膏粉

1%，

碳酸鈣

2%，

含水量

55%

±

1%， pH7。5

。

4。2。3

感官指標 符合表

2

規定。

表

2

專案 要求

棉塞或無棉塑膠蓋 乾燥、潔淨、鬆緊適度，能滿足透氣和濾菌要求

培養基上表面距瓶口的距離

50 mm

±

5mm

接種量 每支母種接原種

4

-

6

瓶

菌種瓶外觀

菌絲體特徵 潔白濃密、生長旺健

培養物表面菌絲體生長均勻，無角變，無高溫抑制線

培養基及菌絲體緊貼瓶壁，無干縮

培養物表面分泌物 無

各種雜菌孢子、菌絲 無

拮抗現象 無

培養物氣味 有蘑菇菌種特有的香味，無酸、臭、黴等異味

培養物鏡檢 菌絲粗壯、無雜菌菌絲和孢子、無蟲及蟲卵

4。2。4

菌絲生長速度：原種瓶應發滿菌絲，在適溫（

24

℃±

1

℃）下菌絲長滿瓶不超過

45

天。

4。3

栽培種

4。3。1

容器規格： 玻璃菌種瓶或塑膠菌種瓶，也可採用不小於

15cm

×

28cm

，厚

0。04mm-0。06mm

的聚丙烯塑膠袋。塑膠袋的衛生標準符合

GB9687

和

GB9688

規定。

4。3。2

培養基 除同

4。2。2。1

和

4。2。2。2

外，另可用以下兩種。

4。3。2

。1

穀粒

98%

，石膏粉

2%，

含水量

50%

±

1%， pH7。5

~

8。0

。

4。3。2

。2

其它經省級或省級以上鑑定適合於雙孢蘑菇菌絲生長的培養基。

4。3。3

感官指標 符合表

3

規定。

表

3

專案要求

棉塞或無棉塑膠蓋 乾燥、潔淨、鬆緊適度，能滿足透氣和濾菌要求

培養基面距瓶（袋）口的距離

50 mm

±

5mm

接種量 每瓶原種接栽培種

30

-

50

瓶（袋）

菌種瓶（袋） 外觀

菌絲體特徵 潔白濃密、生長旺健

不同部位菌絲體 生長均勻，無角變，無高溫抑制線

培養基及菌絲體 緊貼瓶（袋）壁，無干縮

培養物表面分泌物 無

各種雜菌孢子、菌絲 無

拮抗現象 無

培養物氣味 有蘑菇菌種特有的香味，無酸、臭、黴等異味

培養物鏡檢 菌絲粗壯、無雜菌菌絲和孢子、無蟲及蟲卵

4。3。4

菌絲生長速度 栽培種瓶（袋）應發滿菌絲，在適溫（

24

℃±

1

℃）下菌絲長滿菌種瓶（袋）不超過

45

天。

4。3。5

種源 應使用透過省級或省級以上菌種審定委員會審定、認定或登記的品種，並從具有相應技術資質的供種單位引種。

5

抽樣

5。1

質檢部門的抽樣應具有代表性。

5。2

母種按品種、培養條件、接種時間分批編號，原種、栽培種按菌種來源、制種方法和接種時間分批編號。按批隨機抽取被檢樣品。

5。3

母種、原種、栽培種的抽樣量分別為該批菌種量的

10%

，

5%

，

1%

。但每批抽樣數量不得少於

10

支、瓶（袋）；超過

100

支、瓶（袋）的，可進行兩級抽樣。

6

試驗方法

6。1

感官檢驗

6。1。3

表

1

、表

2

、表

3

中除接種量、培養物氣味和培養物鏡檢三項外的各項，用肉眼或

5X

放大鏡觀察。

6。1。4

表

1

、表

2

、表

3

中培養物氣味，以鼻嗅判斷。

6。1。5

表

1

、表

2

、表

3

中培養物鏡檢，用放大倍數不低於

10X40

的光學顯微鏡對培養物的水封片進行觀察，每一檢樣應觀察不少於

30

個視野。

6。1。6

表

2

、表

3

中接種量，需察看菌種廠的生產紀錄。

6。2

細菌檢驗

取少量疑有細菌汙染的培養物，按無菌操作接入

GB4789。28

中

4。8

規定的營養肉湯培養液中，

25

℃

-28

℃振盪培養

1

-

2

天，觀察培養液是否混濁。培養液混濁，為有細菌汙染；培養液澄清，為無細菌汙染。

6。3

母種遺傳和栽培性狀檢驗

6。3。1

Est

同工酶鑑定

取菌齡為

15-20

天的試管母種

，

刮取菌絲

，

按

1：3：0。5

的比例混合菌絲

（g）

、

0。1Mol/L

磷酸緩衝液

（mL）

和石英砂

（g），

研磨成勻漿

，

臺式離心機

10000r/min

離心

5min，

取上清液

，

按

5：1：1

的比例混合上清液、

40%

蔗糖和

0。01%

溴酚藍溶液作為電泳樣品

，4

℃下冷藏備用。採用聚丙烯醯胺凝膠電泳。用

pH8。9Tris-HCl

緩衝液配製

9%

分離膠

，

用

pH8。3Tris-

甘氨酸作電極緩衝液。點樣

75uL， 3

℃下

120V

電泳

20min

後穩壓

200V， 4h

。用固藍

RR

鹽

60mg， 0。1Mol/L

磷酸緩衝液

（pH6。0） 80mL

α

-

萘乙酯

38mg

和β

-

萘乙酯

38mg

溶於

3mL

丙酮配製的染色液染色

，

顯現酶譜

，

再根據特徵帶分型。

6。3。2

栽培性狀

將被檢母種製成原種。採用

4。2。2

。1

的培養基配方（含水量提高到

68%

），配製

360

千克培養基

，

接種後分

3

組

（

每組

2M2）

進行常規管理，根據表

4

所列專案，做好栽培記錄，統計檢驗結果。同時將該母種的出發菌株設為對照，亦做同樣處理。對比二者的檢驗結果，以時間計的檢驗專案中，被檢母種的任何一項時間較對照菌株推遲

5

天以上（含

5

天）者，為不合格；產量性狀差異顯著低於對照菌株者，為不合格；菇體外觀形態與對照明顯不同或畸形者，為不合格。

表

4

檢驗專案 檢驗結果 檢驗專案 檢驗結果

母種發滿所需時間，天

轉潮間隔時間，天

原種發滿所需時間，天

總產，

Kg

栽培種發滿所需時間，天

平均單產，

Kg

菌種萌發所需時間，天

平均單菇重，

g

菌絲髮滿培養基所需時間，天

生物學效率，

%

覆土至扭結所需時間，天

菇型、色澤

覆土至採菇所需時間，天

菇蓋直徑、厚度、柄長、柄的直徑，

mm

6。4

留樣

各級菌種要留樣備查，留樣的數量應每個批號母種

3-5

支，原種和栽培種

5-7

瓶，於

4

℃

-6

℃下貯存，母種

5

個月，原種

4

個月，栽培種

2

個月。

7

檢驗規則

7。1

判定規則按質量要求進行。檢驗專案全部符合質量要求時，為合格菌種，其中任何一項不符合要求，均為不合格菌種。

8

標誌、包裝、運輸、貯存

8。1

標誌

8。1。1

產品標誌 每支、瓶（袋）菌種要貼有清晰註明以下要素的標誌。

a。

產品名稱（雙孢蘑菇母種）

b。

品種名稱（

As2796

）

c。

生產單位（

xxx

菌種廠）

d。

接種日期（

2000。xx。xx

）

8。1。2

包裝標誌 每箱菌種要貼有清晰註明以下要素的包裝標誌。

a。

產品名稱、品種名稱

b。

廠名、廠址、聯絡電話

c。

出廠日期

d。

保質期、貯存條件、執行標準

e。

發貨單位

f。

收貨單位

g。

數量

h。

毛重、淨重

i。

執行標準

8。1。3

包裝儲運圖示 按

GB191

規定，應註明以下圖示標誌：

a。

小心輕放標誌

b。

防水防潮防凍標誌

c。

防曬防高溫標誌

d。

防止倒置標誌

e。

防止重壓標誌

8。2

包裝

8。2。1

母種外包裝採用木盒或有足夠強度的紙材製做的紙箱，內部用棉花、碎紙、報紙等具有緩衝作用的輕質材料填滿。

8。2。2

原種、栽培種外包裝採用有足夠強度的紙材製做的紙箱，每箱

20

瓶，內部用碎紙、報紙等具有緩衝作用的輕質材料填滿。紙箱上部和底部用

8cm

寬的膠帶封口，並用打包帶捆紮兩道，箱內附產品合格證書和使用說明（包括菌種種性、培養基配方及適用範圍）。

8。3

運輸

8。3。1

不得與有毒物品混裝。

8。3。2

氣溫達

30

℃以上時，需用

2

℃

-20

℃的冷藏車運輸。

8。3。3

運輸中須有防震、防曬、防雨淋、防凍、防雜菌汙染的措施。

8。4

貯存

8。4。1

母種一般在

5

℃±

1

℃冰箱中貯存，保藏期不超過

90

天。

8。4。2

原種應儘快使用，

10

天內可在溫度

24

℃±

1

℃、清潔、通風、乾燥

（

相對溼度

70%-75%）

、 避光的室記憶體放。在

5

℃±

1

℃下貯存，保藏期不超過

40

天。

8。4。3

栽培種應儘快使用，在溫度

24

℃±

1

℃、清潔、通風、乾燥

（

相對溼度

70%-75%）

、 避光的室記憶體放穀粒種不超過

10

天，其餘培養基的栽培種不超過

20

天。在

5

℃±

1

℃下可貯存

90

天。