HPLC高效液相色譜檢測平臺

高效液相色譜（High-performance liquid chromatography， HPLC） 是一種色譜分析技術，依賴於泵加壓後色譜柱中填充物對於樣品中各組分吸附力的不同，從而實現各組分快速的分離。

HPLC可以實現絕大部分物質的分離鑑定。液相色譜的誕生，源於氣相色譜對於高沸點有機物分析，如蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質的侷限性。自1980年代，隨著適用於分離蛋白質和其它生物大分子的色譜柱進入市場以來，HPLC開拓了它在生物化學的應用領域。HPLC是目前應用最廣的分析技術，質譜作為分離技術與HPLC競爭的同時又可以在多方面互補使用，如

LC-MS

。迪信泰檢測平臺使用高效液相色譜的方法，可實現對樣品進行鑑定，可高效、精準的進行定量分析。

HPLC分離原理：固定相是固體吸附劑，吸附劑是多孔性微粒物質，表面有吸附中心。樣品組分與流動相競爭吸附中心。各組分的吸附能力不同，使組分在固定相中產生保留時間不同，從而實現分離。

高效液相色譜常用檢測器

（1）紫外可見分光檢測器（UVD）。

（2）雙光路雙流路紫外/熒光檢測器（UV/FLD-1）。

（3）蒸發光散射檢測器（ELSD）。

（4）液相色譜-液相色譜聯用（HPLC-HPLC）。

HPLC檢測原理圖

高效液相色譜法的特點

應用範圍廣：

70%以上的有機化合物可用高效液相色譜法分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差的化合物；

分離效率高：

可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍；

分離速度快：

通常分析一個樣品在15～30 min，有些樣品甚至在5 min內即可完成；

靈敏度高：

紫外檢測器靈敏度可達0。01ng；

能同時分離多種物質：

一根柱子能同時分離的成份可達100種；

樣品量少、容易回收：

進樣量在μL數量級，而且樣品經過色譜柱後不會被破壞，可以收集單一組分或做製備。