SDS-PAGE凝膠製備試劑盒

SDS-PAGE凝膠製備試劑盒

產品編號：

10312

產品規格：

100-150

次

產品內容：

本產品所提供的

APS

（過硫酸銨）為固體粉末，使用前加入超純水溶解即配製成

10%APS

溶液（

1。5 g APS

加

15 ml

純水），將溶液分裝後置於

-20

℃

儲存，通常半年內有效。溶液在使用中可放置

4℃

儲存一個月。

產品簡介：

本產品包括

SDS-PAGE

凝膠製備所需全套試劑，只需自備純水，即可製備高質量各種濃度的變性

PAGE

凝膠，方便、快捷。

注意事項：

1。 10%APS

配製後分裝

-20℃

儲存。

APS

溶液不穩定，應儘量減少室溫存放時間，每次取用後立即放回冰箱，以防失效；若發現凝膠聚合時間延長，應考慮更換使用

-20

度儲存的

10%APS

。

2。 PAGE

凝膠的凝聚速度與溫度以及

APS

、

TEMED

的用量密切相關；在其它條件不變的情況下，可透過改變

APSTEMED

的用量，控制

PAGE

凝膠的聚合速度，凝膠聚合過快不利於操作；附表中的

APS

及

TEMED

量可供參考，應根據實操作情況做適當的調整。

3。

在凝膠配製過程中，尤其是液體混勻步驟，應儘量避免氣泡的產生。

4。

在分離膠上層加純水時要小心操作，加水時速度不能太快。

5。

丙烯醯胺具有神經毒性，操作時請穿著實驗服並佩戴一次性手套。

6。

本產品僅用於科研，不能用於人體實驗或人體治療。

操作步驟：

根據目的蛋白分子量大小選擇合適的

PAGE

分離膠配製濃度，最佳膠濃度請參考附表

II

灌製分離膠（各試劑使用量請參考附表

3

）

1。

參照凝膠模具說明書，裝配好凝膠模具。

注：加入上層篩板有助於加樣時保持填料與樣品均勻接觸，是否加入上層篩板可根據實際情況選擇。

2。

將不同體積的

30%Acr-Bis（29：1）

、

SDS-PAGE Separating Gel Buffer

、

SDS Buffer

和純水在小燒杯或試管中混合。

3。

加入

10%APS

和

TEMED

，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。

4。

在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液（對於

mini-gel

，凝膠液加至約距前玻璃板頂端

1。5 cm

或距梳齒約

0。5 cm

即可），然後在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層

1 cm

的水層，使凝膠表面保持平整。

5。

靜置

30-60

分鐘，待分離膠和水層之間出現一個清晰的介面後，表面凝膠已聚合。

II

灌製濃縮膠（各試劑使用量請參考附表

2

）

1。

去除覆蓋在分離膠上的水層。

2。

將不同體積的

30%Acr-Bis（29：1）

、

SDS-PAGE Stacking Gel Buffer

、

SDS Buffer

和純水在一個小燒杯或試管中混合。

3。

加入

10%APS

和

TEMED

，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。

4。

將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。

5。

將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。

6。

靜置

10~20

分鐘，等待濃縮膠聚合。

7。

待凝膠聚合後，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。

8。

進行常規電泳操作。

附表1. SDS-PAGE分離膠的濃度與適用待測蛋白檢測範圍

附表2. 配製5%SDS-PAGE濃縮膠

附表3. 配製SDS-PAGE分離膠

想了解更多精彩內容，快來關注尚寶生物