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你可能忽略的科研技能,學好直接發論文
醫學中的表型是什麼意思
增殖
增殖——科研界家喻戶曉的一表型,今天就聊聊細胞增殖這些事兒……
所謂
增殖
,就是醫學基礎研究中最常見的表型,而對於該表型可從分子、細胞、組織、動物四個層面上進行相關的檢測。
解螺旋專門針對這個表型,梳理增值表型相關的知識,包括標誌物、研究方法、研究策略等,致力讓大家更好更快的掌握科研的規律。(文末檢視資源領取方式)
一、檢測
科研中常見的用以直接檢測與增殖相關的分子標誌物有三個:
增殖細胞核抗原PCNA,細胞核相關抗原Ki-67和微小染色體維持蛋白MCM
。
通常檢測細胞增殖的方法以下三種,其中MTT以及Brdu法都屬於End-point assay(終點分析法),因為這類技術對於細胞都有破壞作用,檢測過程中細胞已經死亡,結構也不再完整。
(1)MTT比色法
(2)Brdu染色法
(3)RTCA(實時細胞分析法)
二、樣本
臨床上常見的組織樣本有兩種:
石蠟切片
以及存放於液氮中或者深低溫冰箱(-80度)中的
新鮮組織樣本
。通常可從新鮮組織樣本中獲取蛋白、mRNA、lncRNA樣本,用於後續的western或qPCR實驗,而石蠟切片因經過複雜的處理,只能從中提取出質量比較好DNA樣本和miRNA樣本。
值得注意的是,取樣時要注意區分癌組織和癌旁組織,避免後續檢測結果中因組織的混入而帶來實驗的誤差。
三、模型
腫瘤研究中,最常用的動物模型是
移植瘤動物模型
。其優點是接種一定量瘤細胞或無細胞濾液(病毒性腫瘤)後,可以使一群動物帶有同樣的腫瘤,生長速率較一致,個體差異較小,接種存活率近100%。
以此檢測增殖表型時,需要記錄移植瘤的大小/體積,重量等引數。同時,也可將動物的移植瘤樣本進行組織切片或勻漿抽提出總蛋白/總RNA來檢測增殖相關的分子標誌物的表達變化。
四、資源展示
影片截圖
截圖
五、領取方式
回覆【
增殖
】
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